穩(wěn)態(tài)瞬態(tài)熒光光譜儀檢測(cè)測(cè)試
1、定性分析
不同結(jié)構(gòu)熒光化合物都有特征的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,因此可以將熒光物質(zhì)的激發(fā)光譜與發(fā)射光譜的形狀、峰位與標(biāo)準(zhǔn)溶液的光譜圖進(jìn)行比較,從而達(dá)到定性分析的目的。
2、定量分析
在低濃度時(shí),溶液的熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)的濃度成正比:f=kc。其中,f為熒光強(qiáng)度,c為熒光物質(zhì)濃度,k為比例系數(shù)。這就是熒光光譜定量分析的依據(jù)。
上述關(guān)系不適用于熒光物質(zhì)濃度過(guò)高時(shí),熒光物質(zhì)濃度過(guò)高,其熒光強(qiáng)度反而降低。原因有:
(1)內(nèi)濾效應(yīng)。一是,當(dāng)溶液濃度過(guò)高時(shí),溶液中雜質(zhì)對(duì)入射光的吸收作用增大,相當(dāng)于降低了激發(fā)光的強(qiáng)度。二是,濃度過(guò)高時(shí),入射光被液池前部的熒光物質(zhì)強(qiáng)烈吸收,處于液池中、后部的熒光物質(zhì),則因受到入射光大大減弱而使熒光強(qiáng)度大大降低;而儀器的探測(cè)窗口通常對(duì)準(zhǔn)液池中部,從而導(dǎo)致檢測(cè)到的熒光強(qiáng)度大大降低。
(2)相互作用。較高濃度溶液中,可發(fā)生溶質(zhì)間的相互作用,產(chǎn)生熒光物質(zhì)的激發(fā)態(tài)分子與其基態(tài)分子的二聚物或其他溶質(zhì)分子的復(fù)合物,從而導(dǎo)致熒光光譜的改變和/或熒光強(qiáng)度下降。當(dāng)濃度更大時(shí),甚至?xí)纬蔁晒馕镔|(zhì)的基態(tài)分子聚集體,導(dǎo)致熒光強(qiáng)度更嚴(yán)重下降。
(3)自淬滅。熒光物質(zhì)的發(fā)射光譜與其吸收光譜呈現(xiàn)重疊,便可能發(fā)生所發(fā)射的熒光被部分再吸收的現(xiàn)象,導(dǎo)致熒光強(qiáng)度下降。溶液濃度增大時(shí)會(huì)促使再吸收現(xiàn)象加劇。
測(cè)試要求
1.粉末樣品:一般需要20mg以上,塊狀或薄膜樣品要求尺寸在1*25cm-2*50cm之間;
2.液體樣品:5ml左右,濃度根據(jù)文獻(xiàn)調(diào)配;測(cè)液體的量子效率,需同時(shí)提供溶劑5ml;
3.需對(duì)比熒光強(qiáng)度的務(wù)必備注一下:同一測(cè)試條件下測(cè)試對(duì)比熒光強(qiáng)度;
4.測(cè)光譜都是氙燈激發(fā),測(cè)壽命常規(guī)選用激光器(常規(guī)340/375/450的epl或epled)或微秒燈;
5.近紅外產(chǎn)率、變溫近紅外光譜測(cè)試等特殊測(cè)試價(jià)格另議。
確定樣品有熒光/磷光性能,樣品要光激勵(lì)下能發(fā)光,不然所有熒光類(lèi)測(cè)試都沒(méi)有意義!對(duì)于發(fā)光在可見(jiàn)區(qū)的樣品,最簡(jiǎn)單直觀的就是紫外燈或者紫外暗箱照射下看看樣品的發(fā)光。
常見(jiàn)問(wèn)題
1. 測(cè)光譜光源需要用到激光器的?
熒光光譜儀測(cè)常規(guī)發(fā)射譜的光源就是氙燈,測(cè)壽命的激光器光源不適合來(lái)測(cè)光譜!有些材料只能在特定激光激發(fā)下才能產(chǎn)生熒光,其發(fā)射光譜需要特定波長(zhǎng)的大功率激光器來(lái)測(cè),即激光誘導(dǎo)的熒光。